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賽智科技推出茶葉中茶氨酸的高效液相色譜檢測方案

茶氨酸(L-Theanine)是茶葉中特有的游離氨基酸,茶氨酸是谷氨酸γ-乙基酰胺,有甜味。茶氨酸含量因茶的品種、部位而變動。茶氨酸在干茶中占重量的1%-2%。茶氨酸在化學(xué)構(gòu)造上與腦內(nèi)活性物質(zhì)谷酰胺、谷氨酸相似,是茶葉中生津潤甜的主要成份。茶氨酸含量約為新茶的1~2%左右,其含量隨發(fā)酵過程減少.

1.5.jpg

圖為茶氨酸分子式

【茶氨酸的作用】

對中樞神經(jīng)影響:茶氨酸可以明顯促進(jìn)腦中樞多巴胺(dopamine)釋放 ,飲茶抗疲勞作用被認(rèn)為在一定程度上來自這一效果


降壓作用:茶氨酸對腦內(nèi)中樞神經(jīng)遞質(zhì)5-羥色胺分泌量具有調(diào)節(jié)作用


影響記憶:茶氨酸可以增強(qiáng)記憶能力,提高學(xué)習(xí)效率


健康食品:保健食品市場上多數(shù)是為成人防病或改善作用的品種。像茶氨酸這種既不具有催眠,又可以解消疲勞、降低血壓和提高學(xué)習(xí)記憶能力的保健食品實(shí)為少見,引人注目。為此,茶氨酸曾在1998年德國召開的國際食品原料會上獲得研究部門大獎。


    鑒于茶氨酸在市場上的應(yīng)用日趨增長,賽智科技參照GB23193-2008,利用LC-10Tvp高效液相色譜儀給出了茶氨酸的HPLC檢測方案。

    (本應(yīng)用方案請勿轉(zhuǎn)載,侵權(quán)必究)


1、儀器與試劑

   1.1儀器、設(shè)備

   LC-10Tvp高效液相色譜儀

   Vertex 色譜柱:250mm×4.6mm×5μm

   分析天平

   振搖恒溫水浴

   離心機(jī)

   C18固相萃柱

   針頭過濾器

   微孔濾膜:0.45μm

   1.2試劑

  茶氨酸標(biāo)準(zhǔn)品

  鄰苯二甲醛(OPA)

  乙硫醇

  硼酸

  氫氧化鈉

   甲醇(色譜純)

   乙腈(色譜純)  


2、供試品溶液和對照品溶液的制備

    對照品溶液的制備   取茶氨酸儲備液(1mg/ml)適量,用水稀釋成所需濃度。

  供試品溶液的制備  

  1、樣品前處理:茶葉樣品經(jīng)磨碎混勻后,準(zhǔn)確稱取0.5g(精確到0.001g),加水100ml,在80℃振搖恒溫水浴中浸提45min,冷卻后將浸提液離心,過濾,上清液混勻待用。

  2、凈化:C18小柱活化:依次用5ml甲醇,5ml水加入到凈化小柱中,將上述試液過固相萃取柱,在經(jīng)過0.46um濾膜過濾到棕色試管中,待衍生用。

  3、衍生:準(zhǔn)確吸取茶氨酸標(biāo)準(zhǔn)使用液(或樣品液)0.5ml于棕色試管中,加入0.5mlOPA衍生試劑,反應(yīng)2min后,立即取10ml上機(jī)分析。


3、色譜條件

色譜柱:C18, 4. 6 mmx250 mm,粒度5 μm

流動相:以20mmol/l乙酸銨溶液為流動相A,以20mmol/l乙酸銨溶液:甲醇:乙腈=1:2:2為流動相B,VA:VB=1:1

波長:338nm

流速:1. 0 mL/min

柱溫:40℃


4、測定法

分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各10ul,注入液相色譜儀,測定,即得


5、譜圖


圖為茶氨酸樣品

圖為茶氨酸加標(biāo)曲線



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